免疫荧光技术是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素，制成荧光抗体，再用这种荧光抗体（或抗原）作为探针检测组织或细胞内的相应抗原（或抗体）。那么你知道在免疫荧光（IF）实验中会遇到那些问题以及这些问题的解决方法吗？让我们一起来看看吧！问题一：目标蛋白荧光很弱，导致组间差异不显著，导致假阴性结果解决方案：出现这种情况后，首先检查抗体是否正确，是否适用于预处理的组织。有些抗体只适用于冰冻切片，但如果应用于石蜡切片，则会出现弱标记或无标记现象。然后通过文献了解目的...

荧光标记在生物学众多的研究领域中有着十分广泛的应用，已经成为研究体内或细胞成像及生物细胞功能的重要工具。荧光标记方式一般有两种，一种是细胞表达的荧光蛋白，另外一种是化学合成的荧光分子，此外，萤光素酶也是细胞标记的常用方法。每一种荧光分子都有其独te的激发波长和发射波长。萤光素酶不同于荧光分子，其发光机制是利用酶与底物的反应，催化发出的化学发光，其发光并不需要激发光的参与，常用于体内成像及萤光素酶报告基因的定量实验。荧光蛋白如何选择呢？让我们一起来看看吧！一、激发波长/发射波长...

实验室工作中，经常会需要用到纯化的DNA，这时我们通常需要使用一个商业的DNA提取试剂盒对目的DNA进行分离纯化。市面上有很多类型的提取试剂盒，当使用不太熟悉的样本类型时，选择合适的盒子是尤为关键的，应该如何选择呢？让我们一起来看看吧！一、试剂盒组分目前大多数DNA提取试剂盒遵循相同的基本步骤:裂解，柱纯化，洗涤杂质，柱洗脱。然而，不同的盒子在完成每个步骤的方式上有很大的不同。二、使用的样本类型不同的DNA来源有不同的试剂盒，从实验室培养的细胞，到临床样本，土壤样本，甚至指纹...

目前比较常用的提取DNA的方法有：苯酚氯仿抽提法、离心柱法和磁珠法，提取DNA的这些方法有哪些优缺点呢？你都知道吗？让小编带你来看看吧！一、苯酚氯仿抽提法苯酚氯仿提取DNA是利用酚是蛋白质的变性剂，反复抽提，使蛋白质变性，SDS(十二烷基磺酸钠)将细胞膜裂解，在蛋白酶K、EDTA的存在下消化蛋白质或多肽或小肽分子，变性降解核蛋白，使DNA从核蛋白中游离出来。而DNA易溶于水，却不溶于有机溶剂。蛋白质分子表面带有亲水基团，也容易进行水合作用，并在表面形成一层水化层，使蛋白质分子...

抗体保存好，实验失败少。那抗体如何保存合适？让我们一起来看看吧！一、保存温度和条件很多抗体的最佳保存条件是分装成小包装冻存于-20°C或-80°C。分装能使冻融引起的损失减到最小，同时可避免多次在一个管内取样而由枪头引入的污染。分装冻存的抗体，融解一次后剩余抗体应保存于4°C。收到抗体后，应10,000xg离心20秒，使管口螺纹内的抗体溶液全部离心至管底，用低蛋白吸附性的微量离心管分装。分装量的多少取决于每次试验的使用量。分装量不能少于10μl；分装量越少，由于蒸发和吸附于管...